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超高效液相色譜其使用一般包括以下步驟

更新時(shí)間:2025-02-03      點(diǎn)擊次數(shù):682
  超高效液相色譜是一種高效、快速的分析分離技術(shù),通常由高壓溶劑輸送單元、低死體積的色譜系統(tǒng)、快速的檢測(cè)器、快速自動(dòng)進(jìn)樣器和高速數(shù)據(jù)采集、控制系統(tǒng)等組成。這些組件的協(xié)同作用,使得超高效液相色譜能夠?qū)崿F(xiàn)高效、快速、靈敏的分析分離。廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、環(huán)保、石化、食品、化工等行業(yè)。在醫(yī)藥領(lǐng)域,它可用于藥物分析、藥物代謝研究等;在環(huán)保領(lǐng)域,它可用于水質(zhì)監(jiān)測(cè)、空氣污染物分析等;在石化領(lǐng)域,它可用于石油產(chǎn)品分析、催化劑評(píng)價(jià)等;在食品和化工領(lǐng)域,它可用于食品添加劑檢測(cè)、產(chǎn)品質(zhì)量控制等。
  超高效液相色譜的使用方法一般包括以下步驟:
  1、儀器準(zhǔn)備
  清潔:仔細(xì)清潔采樣室、進(jìn)樣器以及管道等部件,使用純凈溶劑清洗流道,確保系統(tǒng)無雜質(zhì)污染,同時(shí)檢查溶劑瓶和毛細(xì)管是否清潔,避免對(duì)樣品造成污染。
  校準(zhǔn):根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求選擇合適的校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品,并按照制定的方法進(jìn)行準(zhǔn)備,確保校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)量可靠、濃度準(zhǔn)確。
  2、開機(jī)與參數(shù)設(shè)置
  開啟儀器:依次打開計(jì)算機(jī)、液相色譜儀主機(jī)電源開關(guān),等待儀器自檢完成。
  設(shè)置參數(shù):在工作站軟件中設(shè)置泵的流量、壓力上限,檢測(cè)器的波長(zhǎng)、靈敏度等參數(shù)。設(shè)置流動(dòng)相的比例、流速、柱溫等色譜條件,這些參數(shù)需要根據(jù)待分析的樣品和所選用的色譜柱來優(yōu)化確定。
  3、樣品制備與進(jìn)樣
  樣品制備:根據(jù)樣品的性質(zhì)和分析要求,對(duì)樣品進(jìn)行適當(dāng)?shù)奶幚?,如提取、過濾、稀釋等,以確保樣品溶液的濃度和純度符合分析要求,并且不會(huì)對(duì)色譜柱造成損害。
  進(jìn)樣:將處理好的樣品溶液注入進(jìn)樣器中,注意進(jìn)樣量的控制,一般UPLC的進(jìn)樣量較小,通常在微升級(jí)別??梢允褂檬謩?dòng)進(jìn)樣或自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣。
  4、數(shù)據(jù)采集與分析
  啟動(dòng)采集:點(diǎn)擊工作站軟件中的“開始”按鈕,啟動(dòng)泵輸送流動(dòng)相,使樣品在色譜柱中分離,同時(shí)檢測(cè)器開始采集數(shù)據(jù)。在數(shù)據(jù)采集過程中,要密切觀察基線的穩(wěn)定性和色譜峰的分離情況。
  數(shù)據(jù)分析:數(shù)據(jù)采集完成后,使用工作站軟件對(duì)色譜圖進(jìn)行處理和分析。可以對(duì)色譜峰進(jìn)行積分、定性和定量分析,確定樣品中各組分的含量和身份。
  5、關(guān)機(jī)與維護(hù)
  關(guān)機(jī):分析結(jié)束后,先關(guān)閉檢測(cè)器的電源,然后關(guān)閉泵的電源,最后關(guān)閉計(jì)算機(jī)。
  清洗維護(hù):使用合適的溶劑沖洗色譜柱和流路系統(tǒng),以去除殘留的樣品和流動(dòng)相,防止堵塞和污染。定期對(duì)儀器進(jìn)行維護(hù)保養(yǎng),檢查儀器的性能和部件的運(yùn)行狀況,及時(shí)更換磨損或損壞的部件。
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